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液相色譜柱的五大填裝方法

發布時間:2022-05-13      點擊次數:179
  1.高壓勻漿法裝填
 
  液相色譜柱將填料懸浮在適宜的勻漿液中制成勻漿,在其尚未沉降之前,很快以高壓泵將其以很高 的流速壓進柱中,便可制備出填充均勻的柱子。這是常見的分析和制備色譜柱的裝填方法。
 
  2.濕法裝填
 
  對于柱、特別是現在流行的以3-10μm細柱徑填料填裝的分析柱,則必須使用濕法,即勻漿法裝柱。因為,隨著粒徑的縮小,因靜電作用和表面能的加大,粒子間傾向于聚集和“粘結”,若以干法填裝,它們會粘附在連接管及柱壁上,也會因強烈的靜電作用彼此排斥,因而難以填裝出均勻而緊密的柱床。這樣,必須改以濕法裝填,即將填料懸浮于適宜的液體中消除上述不良作用。但是,在固 - 液系統中仍然存在因重力而引起的沉降現象。
 
  3.干法裝填
 
  對于粒徑較大的填料,可以用干法裝填,其基本方法與填裝氣相色譜柱類似。但需注意的一點是,在干法填裝制備液相色譜柱時,不要過分劇烈地振動和敲打。振動和敲打會使填料因自身粒徑的不均勻性而產生柱子整體上的不均一性,即較大的填料粒子靠近柱壁,而較細粒徑者則傾向集中于柱中心。這種柱內顆粒分布的不均勻性,會導致柱效的降低。比較好的方法是采用小量多次的方法向柱內加入填料,例如每次加入相當于3-5mm柱床的填料,裝一點即在實驗臺或桌面上垂直地輕輕磕幾十下,續加一些填料后,重復上述操作,直至填裝完成。
 
  4.等密度法裝填
 
  在HPLC發展的早期,常采用“等密度法”來填裝柱。多孔硅膠的骨架密度較高。不同牌號的硅膠因制法不同而有差異,但多在2.2g/cm3以上。因此,需以高密度溶劑配制密度與硅膠骨架密度相近的混合液。常使用的高密度溶劑為碘代和溴代烷類,再與適當比例的其他溶劑相配,配制出具有密度適宜的液體,使填料能呈“失重”狀態懸浮于勻漿液中,以從容地用高壓泵將其壓入空色譜柱中,制出填裝均勻的色譜柱。
 
  5.高粘度法裝填
 
  液相色譜柱高粘度法,即使用黏度較高的勻漿液體系以阻止顆粒的沉降??梢圆捎靡叶?、聚乙二醇、甘油以及石蠟油等高黏度液體調配勻漿液。但是,高黏度導致流體阻力加大,必將延長裝柱時間且需使用更高的裝柱壓力,在實用上很不方便。因此,高黏度法已很少被采用。
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