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c18液相色譜柱為何會出現柱壓突然升高?

發布時間:2022-05-25      點擊次數:42
  c18液相色譜柱在使用中常見的問題就是柱壓升高,如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加,屬于正?,F象。但柱壓在使用過程中突然升高,可能的原因有如下幾點:
  1、液相色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染;
  2、色譜柱頭的填料被樣品污染;
  3、色譜柱內緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑,形成結晶析出;
  4、流動相pH值過大或過小使固定相結構破壞或溶解。
  液相色譜柱解決辦法如下:
  1、如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染,可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,將其放在10%的稀硝酸內超聲清洗10分鐘,后再用純水超聲10分鐘,重新裝入色譜柱。
  2、如確定c18液相色譜柱頭的填料被污染,將柱頭螺絲卸下,挖出柱內前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔細修復后,重新安裝上柱頭螺絲。
  3、如確定定是鹽結晶,用10%的甲醇/水沖洗液相色譜柱使柱內鹽全部溶解,再換高濃度甲醇。
  4、如果因pH值使用不當,很難恢復。
  液相色譜柱樣品制備
  1、樣品應當盡可能溶解在能與流動相相互溶的溶劑中。除特殊指明外,如使用強溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低。
  2、樣品溶液在進樣前應使用針頭式過濾器對樣品預先過濾。頻繁改變流動相組成,會加速降低柱效。
  3、c18液相色譜柱由高壓勻漿法裝填,能承受較高壓力。為獲得*分離效果,使用時請不要超過200kgf,而且避免壓力突然上升或變化,否則會造成硅膠填料的破壞,減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外最高操作溫度不要超過60℃。
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